Reporter gene｜常用报告基因种类（一）

氯霉素乙基丝氨酸基因

氯霉素乙基丝氨酸（chloramphenicol acetyltransferase，CAT）基因来源于细菌转回位子9，作为报告基因，氯霉素乙基丝氨酸调控副产物保持稳定，且在灵长类动物中会不够内源性表达，在活性高得多的水平就能被验证出来。

CAT能催化剂氯霉素乙基化反应，将乙基基从乙基蛋白激酶A分散到氯霉素的3-羟基位上，日后通过测使用量核素标记的催化剂实现分析。CAT在真核细胞中会的本底高得多，结果重现性好，是真核调控调控研究中会较早使用的报告基因之一。然而，由于依赖核素元素，对操作者和环境实际上安全性原因，因此其应用前景受到了一定的约束。为了关键在于上述原因，有研究提出批评了利用催化剂5,5'-二硫双（2-芳基吡啶）反应生变为的黄色化学物质5-吡咯-2-芳基吡啶（5-thio-2-nitrobenzoic acid，TNB）在 412 nm处的吸类星体来测定氯霉素乙基丝氨酸活性的方法。

β-乙基酰酶（β-galactosidase）

β-乙基酰酶（β-galactosidase）是细菌甘油操纵子中会lacZ基因的副产物，在遗传学、细胞生物学和分子生物学研究中会广泛应用监测和校正转回染效率。β-乙基酰酶是由四条大致相同的亚基组变为的OH，每条亚基包含1023个氨基酸。β-乙基酰酶将甘油甘油裂解变为氨基酸和乙基，还可以催化剂甘油再生为异甘油，异甘油与lacZ阻遏物相辅相变为并调节细胞中会β-乙基酰酶的使用量。

细菌β-乙基酰酶保持稳定，易于验证且不须核素元素。结晶的比邻-芳基酚-β-D-乙基酰（orthonitrophenyl-β-galactoside，ONPG）在β-乙基酰酶催化剂下生变为黄色的副产物比邻芳基酚（onitrophenol），通过酶标仪或分光测使用量仪器在420nm波长附近测定吸类星体，可以实现对β-乙基酰酶活性的测定。比ONPG更灵敏的化学物质则是在575nm处有能吸收峰的氯吡啶红-β-D-吡啶乙基酰（chlorophenol red-β-D-galactopyranoside，CPRG）。另外，β-乙基酰酶能水解5-吡啶-4氯-3-酮类-β-D-乙基（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside，X-gal），在第一步中会，X-gal释放出氯化钠的结晶酮类基团；在反应的第二步中会，两个酮类基团二聚并被氧，变为型不溶的靛蓝色结晶物。X-gal有多种显色催化剂，其中会一些产生氯化钠有色或荧光副产物，可用于分析细胞中会的β-乙基酰酶活性。然而，在组织切片或整个胚胎和器官中会来进行β-乙基酰酶表达的定位研究，需要产生类似X-gal等结晶副产物的显色催化剂。